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        如何選擇合適的透析袋,關系到試驗的準確性

         發布時間:2022-05-18 點擊量:176
           透析已成為生化實驗室簡便、常用的分離純化技術之一。透析的主要作用是消炎殺菌、深層清洗、深層排毒,有利于皮膚吸收。生物大分子生產過程中,除鹽、去除少量有機溶劑、去除生物大分子雜質、濃縮樣品等都要采用透析技術。透析袋通常是半透膜制成的袋狀容器。

          透析袋的選擇
         
          1、選擇合適的截留分子量。
          截留分子量的選擇基于膜內預約的大分子的分子量和去除的小分子污染物的分子量。為了達到合理有效的分離,需要分離的兩種物質的分子量比例至少為25。選擇陷阱分子量經驗法則:為了得到至少90%的保持率,選擇陷阱分子量的值約為所保持的高分子分子量的一半。
          分子量差超過100倍時,可以同時確保高收率和高純度。
          分子量差為10倍時,為了追求高收率,可以選擇低截留分子量;為了追求高純度,可以選擇高截留分子量。例如,在產品(CytC,20KD)和雜質(vitB12,2kd)的情況下,將重點放在收率上,選擇分級分子是提高產品分子量的80%-100%以及收率,用分級分子量20KD的膜進行CytC和vitb12以純度為重點,但以收率為代價,選擇分級分子量高的膜,樣品的保持率為50%-80%左右,用分級分子量為50KD的膜分離CytC和VitB12,達到收率76%左右和約2%的B12的殘留。
          對于分離幾個分子的應用,分子間的分子量差至少要5倍才能完成有效的膜透析。如果不能滿足分子量差異要求,可能需要使用其他分離技術,如色譜法和切向流過濾。
          2、選擇合適的扁平寬度(體積)
          滲透袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。小透析管透析更快;大的透析管由于擴散距離長,透析慢。為了方便使用,建議使用全長(包括封閉夾和頂部空間)約10-15cm的透明包。
          3、選擇合適的透析膜材質
          各個膜的親和性因分子而異。對球蛋白,相對結合親和性由低到高CE<;RC<;PVDF。

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