鎳NTA瓊脂糖凝膠具有特異性好、流速快的優點，顆粒粒度均勻，粒徑小，并且螯合鎳更穩定，能耐受更高的還原劑，物理和化學穩定性好，批次重復性好。本產品已經螯合好鎳離子，使用更方便。 鎳NTA瓊脂糖凝膠在非變性條件下抽提His標簽蛋白，其操作流程如下：
1.準備細胞，接種，誘導表達。收集細胞，置于-70°C或立即進行步驟2操作。
2.加入1/20細胞生長體積的NTA-0Buffer和PMSF。PMSF使用的工作濃度為1mM現用現加。
3.將細胞懸浮起來，加入溶菌酶，混勻，冰上放置30分鐘，超聲或勻漿破碎細胞。該步驟冰上操作。
4.加入10%TritonX-100,使終濃度為0.05%，充分混勻，冰上放置15分鐘。
5.12000rpm/min，4°C離心15分鐘以上。取上清，置于冰上備用或-20°C保存。
6.將NTA樹脂裝入合適的層析柱，層析用10倍NTA體積的NTA-0Buffer洗。
7.將樣品加至NTA層析柱中，流速在15ml/h左右，收集穿透部分，用SDS/PAGE分析蛋白的結合情況。
8.層析用5倍NTA體積的NTA-0Buffer洗，流速控制在30ml/h左右。
9.分別用5倍NTA體積的洗脫，流速控制在15ml/h左右，收集洗脫液，每管收集一個NTA體積。
10.確定目標蛋白質在洗脫液中的分布情況。有效的方式是SDS-PAGE分析；也可以用Bradford蛋白質測定試劑盒，快速確定蛋白質的含量，然后用SDS/PAGE分析蛋白質的分布。
11.化的目標蛋白質的保存條件需要根據蛋白質的性質和用途確定。
鎳NTA瓊脂糖凝膠在位清洗技巧：
1、除去因離子交換作用吸附的蛋白，用2~3倍柱床體積2MNaCl溶液淋洗柱子，再反向淋洗。
2、除去蛋白沉淀、疏水性蛋白，用1MNaOH以100cm/h的速度淋洗柱子1h。
3、所有操作中，都要用至少3倍柱床體積的初始緩沖液洗柱子。
4、除去強的疏水性蛋白和脂質等，用4倍柱床體積的70%的乙醇或者30%的異丙醇洗柱子，再反向淋洗。
